程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究中的困难重重

循环细胞核( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检标本”，已在转回性乳白滴病、癌和结直肠癌之中用于结节病评价。小细胞核膀胱癌(Small celllung cancer，SCLC)有组织标本不太可能不足以，且缺少有效地的检测入院转回和预测结节病的生物；也。近来数据的系统性者CTCs在SCLC之中的外科应用领域顺利完成了探寻性数据的系统性，推测CTCs对SCLC的检验、分期，检测入院、转回，的系统性报告、结节病以及确立形体用药方案等具关键性意义，本文就CTCs在SCLC外科应用领域之中的数据的系统性进展应予综述。

一、SCLC病症CTCs的验证作规

CTCs的验证作规主要有流式细胞核验证新科技( fluocytometry，FCM)、逆转录一催化自由基链式自由基(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch的系统、CTC芯片(CTC-chip)新科技和细胞膜简而言之分离细胞核新科技(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其之中CellSearch的系统因其半自动化的操作的平台，较高的专一性、专一性和可重复性，成为最时常应用领域的CTCs验证作规。

较早在2004年，Allard等率先应用领域CelISearch规验证了99实有膀胱癌（未列举SCLC实有数）病症的CTCs，随后Nagrath等转用CTC-chip规验证了55实有膀胱癌病症外周滴C TCs。2009年以后的数据的系统性多转用CeIISearch规验证SCI．C病症外周滴CTCs，然而该作规由于对缺少上皮核形态的细胞核会再次出现漏检不太可能，且与免疫磁珠及抗体相辅相成的CTCs无规行某些更全面的验证，外科应用领域受到基本上。

近来，随着聚乙烯科技的发展，靶向CTCs表面会；也的专一性识别分f修饰的聚乙烯材料相辅相成微流控新科技的CTCs验证的平台的数据的系统性受到广泛应用领域高度重视，2013年，《自然》（Nature）杂志将CTCs聚乙烯验证入选为最具创新性和转化潜力的检验新作规，成果实在太瞩目。但就目前来看，基本的CTCs验证作规各有利弊，未有数据的系统性确认哪种作规对SCLC的CTCs验证更有优势。着眼下一代，亟只需开发专一性、专一性更高的CTCs验证新科技，为SCLC的基础和外科数据的系统性带来有所突破。

二、CTCs在SCLC外科应用领域之中的数据的系统性现状

（一）CTCs除此以外与SCLC的检验、分期

近来多项数据的系统性标示出CTCs除此以外总体与SCLC的检验、分期有密切关系0 2009年Tanaka等应用领域CeIISearch规验证了1 50实有7.5ml外周滴CTCs，其之中膀胱癌1 25实有、非恶性25实有，膀胱癌病症包括116实有非小细胞核膀胱癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9实有SCLC。

数据的系统性结果标示出SCLC病症CTCsHIV率为66.70-/0（6实有／9实有），轻微高于NSCLC病症的CTCsHIV率(白滴病25.9%，鳞癌40.9%；白滴病对比SCLC，P

同年，Hou等应用领域CeIISearch规验证了50实有初治的SCLC病症外周滴CTCs，包括20实有基本上期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病症和30实有广泛应用领域期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病症，孔径期ED-SCLC及LD-SCLC病症的之中位CTCs除此以外计有237和2个/7.5ml滴，7实有未检出CTCs的病症除此以外为LD-SCLC，证明CTCs除此以外总体与SCLC分期无关。

相同的结论在2012年被日本学者Naito等确认，数据的系统性者在51实有SCLC病症忠于用CeIISearch规验证孔径期CTCs总体，结果标示出ED-SCLC,病症的之中位CTCs除此以外为9.5个f 7.5ml滴，而LD-SCLC仅为1个／7.51111滴，全面证明ED-SCLC病症的CTCs总体高于LD-SCLC病症。

（二）CTCs的系统性报告SCLC的及结节病

CTCs是否可作为的系统性报告SCLC和结节病的有救常指f,匙数据的系统性者们长期在概述的难题。Houi等在2009年通过CellSearch规验证了50实有SCLC病症(LD-SCLC20实有，ED-SCLC30实有)的CTCs，推测CTCs>300个/7.5ml滴的病症及CTCs

孔径期CTCs>=50和

在该数据的系统性之中SCLC病症的结节病界定绝对值实体化8个/7.5ml滴，以此将病症分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样应用领域CellSearch规验证59实有SCLC病症在孔径期、1周期化学疗规后及4周期化学疗规结束后外固滴CTCs总体，其之中ED-SCLC病症38实有，LD-SCLC病症2 1实有c孔径期有43实有病症(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml滴，CTCs>215个/7.5ml滴和CTCs

经过1周期化学疗规后病症CTCs总体轻微降低，且1周期化学疗规后CTCs

数据的系统性者推断CTCs总体是SCLC结节病的实质上直接影响因子，其之中1周期化学疗规后CTCs总体是SCLC和结节病最强的预测因子。

2013年ASCO发表的ECOG1508数据的系统性之中，数据的系统性者尝试在155实有ED-SCLC之中加入靶向用药，并对其之中123实有病症孔径期CTCs顺利完成验证，结果标示出靶向用药未能延长ED-SCLC病症的PFS和OS，但推测孔径期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml滴的mPFS计有4.4和4.3个月（P=0.07），OS计有10.7和7.2个月(P=0.01)。数据的系统性者确信虽然靶向用药没能提高ED-SCLC病症的PFS和OS，但却推测了CTCs不太可能是SCLC病症的结节病；也。

已经有，Igawa等尝试应用领域OBP-401试验验证SCLC病症外周滴CTCso应用领域OBP-401试验验证乳白滴病和胃癌病症CTCs的无关数据的系统性已有前期引述。数据的系统性纳入30实有韧治的SCLC病症，29实有病症(96%)外周滴CTCsHIV。在孔径期，21实有病症CTCs

（三）CTCs检测SCLC的入院和转回

基本的数据的系统性说明了通过验证CTCs的再次出现来检测SCLC的入院和转回具关键性的外科意义o Tanaka等数据的系统性推测CTCs总体‘j 125实有膀胱癌病症（包括9实有SCLC病症）进展轻微无关，特别是与所在位置转回密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，译者确信CTCs可作为检测膀胱癌所在位置转回的生物标记物。Natio等数据的系统性推测SCLC在孔径期、用药结束后及入院后CTCs的HIV率计有68.6%、26.5%和67.6，高亮SCLC入院后外周学CTCs总体升高，遭遇所在位置转回脏器的比率为0、1和>=2的病症其之中位CTCs除此以外计有2.0、7.5和21个/7.5ml滴,高亮CTCs总体与所在位置转回脏器的比率有关，所在位置转回越多，CTCs除此以外越高（p

三、CTCs在SCLC外科应用领域之中的探寻朝著

入院和转回是造成病症用药失败和死亡的主要诱因，即时推测的入院和转回并采敢积极有效地的用药措施可突出提高病症增重。然而，由于SCLC缺少能够检测入院和转回的生物；也，且时常规影像学检查无规推测微转回灶及微小残存病灶，造成遭遇入院和转回的SCLC病症无法即时给予检验和用药。

外科之中部分LD-SCLC的病症结节病相同之处较大，高亮有些基本上期的病症在检验时不太可能已遭遇了影像学无法推测的微转回而成为潜在的广泛应用领域期病症。通过验证外周滴CTCs的再次出现及比率转变从而对SCLC病症毒素精神状态顺利完成实时、动态地检测和评价，即时推测的入院、转回，将有助于外科牙医对用药适时的毕竟和用药策略的选择，但究竟CTCs的比率或转变绝对值为多少时能够精确反映SCLC的入院或转回唯不恰当，必须更多的循证医学证明应予支持。

CTCs在的系统性报告SCLC病症用药各个方面的应用领域唯位处探寻阶段，用药过程之中CTCs比率的转变与SCLC病症化学疗规的无关性及其与SCLC病症化学疗规适时的选择等难题在下一代只需大量的外科数据的系统性。近5年，对CTCs是否可作为SCLC病症结节病常指标的数据的系统性慢慢地增多，但SCLC最佳的结节病CTCs界定绝对值唯无定论，争议少有。

其之中3项来自Hou、Naito、Hiltermann的数据的系统性将SCLC的结节病CTCs用者定绝对值分别实体化为50、8和2个／7.5ml滴，相同之处不小，这不太可能与数据的系统性转用的流行病学作规不尽相同以及入组样本量较少有关。近期西西里岛学者Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC病症互换数据的系统性，对孔径期、l周期化学疗规后CTCs以及用药前后CTCs的转变绝对值分别实体化结节病界定绝对值，为下一代的数据的系统性包括了一新思路。此番所在的人才培养团队也正己任现状SCLC病症结节病最佳CTCs界定绝对值的数据的系统性，结果实在太希望。

的形体用药是用药方式在的发展朝著。SCLC病症对化学疗规药物的自由基存在轻微的个体相同之处，其主要诱因不太可能与简单的异质性、性状表达相同之处及多态性有关。所以，逐步明晰SCLC的序列学形态对实现真正意义上的SCLC形体用药尤为关键性。近期现状学者王洁等数据的系统性人员通过应用领域单细胞核性状核酸手段对病症单个CTC顺利完成全部都是序列、外显子序列核酸。

在此项数据的系统性之中，谢晓亮研究员发明的多重退火和卤代烃循环的增为新科技(MAIBAC)，急于实现了对病症外周滴单个CTC的全部都是序列增为和最深处核酸，在单个细胞核总体探测全部都是序列性状拷贝数性状(CNVs)和单核苷酸性状(SNVs)o单细胞核总体CTCs序列核酸新科技可即时包括如抗药性性状突变等形体用药所只需的关键性信息，同时也为下一代SCLC靶向药物的开发包括新科技支持。

SCLC有组织标本难以获取，限制了更全面各项检查和数据的系统性的开展，而并用CTCs紧密相辅相成的SCLC循环细胞核移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望消除这一棘手难题。已经有，Hodgkinson等尝试将6实有ED-SCLC病症lOml外周滴之中的CTCs分离出后注射到免疫缺陷小鼠表皮，结果在4只小鼠身上形成了CDXs，证明SCLC病症的CTCs具致瘤性。

同时应用领域CelISearch规验证这6实有SCLC病症的CTCs，结果标示出急于形成CDXs的4实有病症的CTCs除此以外除此以外>400个／7.5ml滴，而另外2实有未形成CDXs的病症其CTCs除此以外计有222和20个／7.5ml滴，高亮SCLC的CTCs致瘤性与外周滴CTCs教量有关。全面的系统性推测相较于化学疗规专一性SCLC，化学疗规抗药性性SCLC病症的CDXs减半时间段窄、土壤更迅速。对3实有CDXs给予顺铂和充分并用泊苷化学疗规药物，其专一性以此类推为CDX3>CDX2>CDX4，相应病症的OS计有9.7.3.5.0.9个月，高亮对CDXs顺利完成体外药敏试验可以间接自由基病症生存时间段。

该数据的系统性标示出部分SCLC的外周滴CTCs具干细胞核特性，可顺利完成体外培养、形成与原发高度相同的CDXs，为SCLC病症的体外药敏试验、抗药性组态的系统性等一系列检查和数据的系统性包括了足量的有组织，消除了SCLC病症标本不太可能不足以的难题。

结论

从现行的数据的系统性可以窥见，虽然CTCs在SCLC之中的外科应用领域仍位处探寻阶段，但机遇宽广。目前，诸多转化性数据的系统性正在顺利完成之中，显然随着数据的系统性的不断深入，CTCs有望成为SCLC的有所下一步，希望CTCs在SCLC的领域之中为我们带来有趣。

编辑： 雪